HepG2人肝癌耐药细胞特性:
生长特性:贴壁生长
形态特征:上皮细胞
微生物及支原体检测:阴性
安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下(zui好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1.弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的*次传代一般是一传二。
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肝癌耐药细胞